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酶標抗體效價測定程序

各種HRP酶標記成抗體的效價測定程序如下(如:羊抗鼠IgG-HRP的效價測定):

1、抗原包板:15ug/ml 小鼠IgG-pH9.6·CB液 0.1ml/孔;

2、37°C包被60min或4°C過夜;

3、PBST洗板3次,5min/次;

4、加入倍比稀釋的HRP標記抗體 0.1ml/孔;

5、37°C 30min;

6、PBST洗板5min/次×3;

7、底物液0.1ml/孔 37°C 5-10min;

8、終止液:2N H2SO4 0.05ml/孔;

9、450nm 測定OD值;

10、陽性OD值比對照值大3倍,為判斷效價稀釋度。

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